■ 基本信息
細胞名稱: | A-549、A549人肺癌細胞 |
背景資料: | 該細胞系是1972年由Giard DJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性。 |
細胞來源: | ATCC CCL-185 |
代次: | P3 |
STR鑒定: | 已通過 |
規(guī)格: | ①1ml凍存 ②T25復蘇 |
細胞數: | 1x10^6 cells |
生物安全級別: | 2 |
組織來源: | 肺癌 |
細胞形態(tài): | 貼壁；上皮細胞樣 |
細胞活力: | 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） |
細胞檢測: | 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
培養(yǎng)條件: | F12K +10% FBS+1%P/S；37℃，5% CO2 |
傳代方法:
| 建議1:2-1:3 兩天換液一次 |
凍存條件: | 90%FBS+10%DMSO |
■ 運輸
凍存細胞：干冰運輸，液氮保存（或-80℃冰箱不超過1周）
復蘇細胞：常溫運輸
T25 瓶細胞處理方法：
收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。正常請進行以下操作：
1）75% 酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2）將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中預溫 3-4 小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3）顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200× 各一張）
前三天照片為重要售后依據，不提供或未拍照默認收到狀態(tài)良好。
4）貼壁細胞：若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第三步中準備的 5-6ml 培養(yǎng)基。放到 37 度培養(yǎng)箱培養(yǎng) 。待細胞密度達到 80% 以上，進行傳代。密度達到 80% 以上，將細胞傳代培養(yǎng)。
懸浮細胞：將瓶內所有培養(yǎng)基離心收集，重懸計數根據密度進行分瓶，密度在3x105/ml 為宜。
收到第一次傳代比例建議 1:2，之后可根據細胞密度和增殖情況適當調整。
注：
培養(yǎng)瓶內非完全培養(yǎng)基，請務必使用新鮮培養(yǎng)基。 收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題，請當天反饋并提供圖片，且保存前三天照片以便分析。7 天內反饋，細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因導致可根據實際情況酌情處理；7 天內未接到任何反饋視為合格，不予免費售后。
凍存管收到處理方法：
收到細胞后，檢查外包裝情況和箱內是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等問題，請即時聯系。正常請進行以下操作：檢查干冰揮發(fā)情況，將細胞取出轉移至 -80 度冰箱 ( 不超過一周）或液氮保存 ,建議盡早復蘇。復蘇后有活性狀態(tài)問題及時與我們聯系，免費重發(fā)一管并有技術人員與您溝通指導復蘇第二管。
