■ 產(chǎn)品介紹
Y1HGold菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)用菌株，MATα型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行篩庫試驗。Transformation marker為: ura3，leu2；報告基因為：AbAr。Y1HGold-GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：pAbAi和PGADT7。質(zhì)粒pAbAi的篩選標志為URA，用于表達pBait-AbAi construct (1~3個bait DNA序列重復串聯(lián)后克隆到pAbAi中)；質(zhì)粒PGADT7的篩選標志為LEU，用于表達AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)與目標蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)原理：Aureobasidin A(AbA)是一種環(huán)酯肽抗生素，在低濃度(0.1-0.2μg/ml)下即可對酵母產(chǎn)生毒性。基因組中整合了pBait-AbAi的酵母菌株（Bait-Reporter Yeast Strains），當獵物蛋白（Prey）結(jié)合到誘餌序列（Bait DNA）上，GAL4 AD就會激活AbAr的表達，從而能夠在含有抗生素AbA的培養(yǎng)基上生長。AbAr與營養(yǎng)缺陷報告基因相比具有更低背景的優(yōu)點，可以降低酵母單雜假陽性發(fā)生的概率。在28℃有氧的條件下，Y1HGold菌株在無抗性的YPDA上生長，使用30%的甘油可保藏菌種。 |
基因型： | MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD/YPDA |
菌株類別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，有氧，YPD/YPDA |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 化轉(zhuǎn)/電轉(zhuǎn) |
保存方式: | 30%甘油，-80℃ |
基本應用: | 酵母單雜交 |
■ 使用方法
收到菌液及時四區(qū)劃線活化，挑取單克隆在YPD中培養(yǎng)到生長對數(shù)中后期加入終濃度30%無菌甘油保種，分裝置于-80℃保存，避免反復化凍。建議超凈臺內(nèi)劃線涂板，避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會變粉，是正?，F(xiàn)象，可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降，不建議直接長期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存，反復凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實驗室研究，不能用于動物，人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康，請穿 實驗服并戴一次性手套操作。
