產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品是專用于染料法（SYBR GreenⅠ）實時熒光定量PCR 的預(yù)混體系。2×濃度，操作簡單方便；新一代的高效熱啟動酶，針對qPCR優(yōu)化的PCR buffer與增強劑，使本產(chǎn)品特異性強，靈敏度高，在寬廣的模板濃度范圍可以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可信度高。
適用機型：
ABI Prism 7500, ABI Prism 7500 Fast, ABI QuantStudio Dx/3/5, ABI QuantStudio 6/7/12K Flex, ABI ViiA 7, Stratagene Mx3000P/Mx3005P/Mx4000
三步法熒光定量PCR
步驟 | 溫度 | 時間 |
|
預(yù)變性 | 95℃ | 30 s |
|
變性 | 95℃ | 10 s | 35-40 個循環(huán) |
退火 | 56-64℃ 1） | 10 s |
延伸 | 72℃ | 30 s 2） |
融解曲線分析 3） |
|
|
|
| 95℃ | 15 s |
|
| 60℃ | 1 min |
|
| 95℃ | 15 s |
|
| 60℃ | 15 s |
|
注意：
1）無法得到理想的擴增效率時，適當(dāng)降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時，提高退火溫度。
2）對于300bp以內(nèi)的片段，延伸時間30s即可，200bp以內(nèi)的片段，延伸時間20s即可。
3）本說明是以ABI 7500熒光定量PCR儀為參照設(shè)定，融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設(shè)定。
